Sanger测序

亚硫酸氢盐处理+Sanger测序是DNA 甲基化分析的金标准。经过亚硫酸氢盐处理后，用 PCR 扩增目的片段，并对PCR 产物进行测序，将序列与未经处理的序列进行比较，判断 CpG 位点是否发生甲基化。这种方法可靠，且精确度高，能明确目的片段中每一个 CpG 位点的甲基化状态。

TaqMan探针法

TaqMan探针和PCR 引物来区分甲基化和未甲基化的DNA。首先用亚硫酸氢盐处理 DNA 片段，并设计一个能与待测位点互补的探针，随后开展实时定量 PCR。这种方法最大的优势在于其高通量和高敏感性，且无需在 PCR 后电泳、杂交等操作，减少了污染和操作误差。

高分辨熔解曲线（HRM）法

亚硫酸氢盐处理后，甲基化与未甲基化 DNA 会存在序列差异，这种差异可通过熔解曲线分析来发现，因为甲基化 DNA 含有更多的 GC，相对更难熔解。根据熔解温度及峰型的变化，可轻易区分完全甲基化、完全非甲基化或杂合甲基化。高分辨率熔解 (HRM) 技术可检出极微小的差别。使用这种方法进行甲基化分析仅需一对引物，相比其它的方法更加快捷、简便和精确。

样本类型
植物：叶、茎、皮、花、果实、种子、块根、干样本、中药材等；

动物：组织、细胞、血液、干血斑、拭子、骨骼、唾液、石蜡切片、毛囊、粪便、尿液、分泌物、法医检材等；

微生物：真菌、细菌，土壤、粪便等；

藻类：如硅藻、蓝藻、绿藻、褐藻等。

送样要求
1. 样本本身DNA无明显降解。可提供新鲜材料，冻存材料或样本保护液保存的材料。建议使用样本保护液采集和保存样本，可常温下运输样本，方便操作，DNA质量更好;
2. 完整准确填写样本信息表，干冰运输（使用样本保护液的样本无需干冰运输）;

3. 样本无传染性、无致病性;

4. 基因信息：待测STR/SSR 位点、序列或引物.