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服务内容
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项目 |
说明 |
周期 |
配套产品 |
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靶点设计 |
靶点位置尽量在基因CDS的前1/3，最好能破坏重要的domain和所有的转录产物isoform |
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体外检测靶点活性 |
体外表达gRNA，Cas9酶，扩增靶点，酶切验证，筛选有切割活性的靶点进行Cas9/gRNA载体构建。 |
1周 |
Cas9-gRNA靶点效率检测试剂盒，T7E1酶 |
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Cas9/gRNA载体构建 |
将gRNA序列信息连接到带Cas9的表达载体上，有多种针对不同植物和动物优化的载体可供选择（附后）。 |
1周 |
CRISPR/Cas9载体构建试剂盒 |
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细胞内源切割活性验证 |
将Cas9/gRNA质粒转入目标细胞（植物为原生质体），检测细胞突变率。可提供内源活性大于5的靶点TALEN质粒（可选）。 |
1周 |
核酸免提试剂盒 T7E1酶（检测突变） |
注：若细胞转染效率低或需要稳转Cas9-gRNA细胞，可选择慢病毒CRISPR-Cas9载体
可选载体
编号
描述
骨架
动物
VK001-01
哺乳动物细胞
gRNA-Cas9
VK001-02
哺乳动物细胞（荧光抗性标记）
gRNA-Cas9
VK001-03
体外转录
gRNA-Cas9
VK001-04
哺乳动物/细胞-荧光抗性标记puro-t2a-mcherry（vk001-02-mcherry）
gRNA-Cas9
VK001-05
哺乳动物/细胞-Cas9-D10A(Cas9突变体)
gRNA-Cas9
VK001-06
哺乳动物/细胞-Cas9-D10A-荧光抗性标记 puro-t2a-GFP(Cas9突变体)
gRNA-Cas9
VK001-08
家禽细胞（cU6-3-gRNA-puro-t2a-GFP）
gRNA-Cas9
VK001-09
昆虫细胞
gRNA-Cas9
植物
VK005-11
单子叶植物，特别用于水稻(Ubi-mpCas9-rU6-35s-GFP)
gRNA-Cas9
VK005-12
双子叶植物(Ubi-dpCas9-atU6-35s-GFP)
gRNA-Cas9
VK005-01
单子叶植物，特别用于水稻（Ubi-mpCas9-rU6-gRNA-35s-潮霉素）
gRNA-Cas9
VK005-02
单子叶植物，特别用于水稻 （Ubi-mpCas9-rU6-gRNA-35s-草铵膦）
gRNA-Cas9
VK005-03
双子叶植物（Ubi-dpCas9-atU6-35s-潮霉素）
gRNA-Cas9
VK005-04
双子叶植物（Ubi-dpCas9-atU6-35s-草铵膦）
gRNA-Cas9
VK005-05
单子叶植物（Ubi-mpCas9-wU6-35s-潮霉素）
gRNA-Cas9
VK005-06
单子叶植物（Ubi-mpCas9-wU6-35s-草铵膦）
gRNA-Cas9
VK005-07
单子叶植物，特别用于水稻(Ubi-mpCas9-rU6-Nos-卡那霉素)
gRNA-Cas9
VK005-08
双子叶植物，卡那霉素筛选标记(Ubi-dpCas9-atU6-Nos-卡那霉素)
gRNA-Cas9
VK005-09
单子叶植物，卡那霉素抗性(Ubi-mpCas9-wU6-Nos-卡那霉素)
gRNA-Cas9